วิธีการคำนวณจำนวนแบคทีเรียที่มีอยู่

Posted on
ผู้เขียน: Laura McKinney
วันที่สร้าง: 2 เมษายน 2021
วันที่อัปเดต: 18 พฤศจิกายน 2024
Anonim
Spread plate technique เพื่อการวิเคราะห์หาจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมดด้วยวิธี Standard Plate Count
วิดีโอ: Spread plate technique เพื่อการวิเคราะห์หาจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมดด้วยวิธี Standard Plate Count

เนื้อหา

นักวิทยาศาสตร์ใช้การเจือจางต่อเนื่อง (ชุดการเจือจาง 1:10) เพื่อคำนวณความหนาแน่นของประชากรของวัฒนธรรมแบคทีเรีย เมื่อหยดของวัฒนธรรมที่บรรจุแบคทีเรียจำนวนเล็กน้อยถูกชุบและบ่มแต่ละเซลล์ในทางทฤษฎีจะอยู่ห่างจากเซลล์อื่น ๆ มากพอที่จะก่อตัวเป็นอาณานิคมของตนเอง (ในความเป็นจริงบางอาณานิคมอาจเป็นลูกหลานของเซลล์สองแห่งที่อยู่ใกล้เคียง แต่นี่เป็นสิ่งที่หายากในวัฒนธรรมที่เจือจางและดังนั้นจำนวนของอาณานิคมจึงเป็นค่าประมาณที่ดีมากของจำนวนเซลล์ที่ถูกถ่ายโอนไปยังจาน) ไม่ทราบความหลากหลายของการเจือจางจะต้องใช้เพื่อจบลงด้วยหนึ่งจานที่มีจำนวนอาณานิคมที่เหมาะสม

Dilutions อนุกรม

    ติดฉลากหลอดทดลองหกหลอด (แต่ละหลอดที่มีสื่อการเจริญเติบโต 9 มิลลิลิตร) เป็น 1 ถึง 6 ติดฉลากแผ่นอะการ์ทั้งหกเป็น 1 ถึง 6 ใช้ปิเปตและปลอดเชื้อทิปปิเปต 1 มิลลิลิตรเพื่อถ่ายทอดเชื้อแบคทีเรีย 1 มิลลิลิตร 1

    ผสมให้เข้ากันและถ่ายโอน 1 มิลลิลิตรจากหลอด 1 ไปยังหลอด 2 โดยใช้ปิเปตและทิป 1 มิลลิลิตรที่ปราศจากเชื้อ

    ทำซ้ำขั้นตอนที่ 2 สำหรับหลอดที่เหลือทุกครั้งที่ถ่ายโอน 1 มิลลิลิตรจากหลอดที่ใช้ล่าสุดไปยังหลอดถัดไป

    ใช้ปิเปตและทิป 0.1 มล. ที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วเพื่อถ่ายโอน 0.1 มิลลิลิตรจากหลอด 1 ไปยังจานวุ้น เปลวไฟที่ก้านแก้วรูปตัว L และใช้มันเพื่อกระจายการลดลงอย่างสม่ำเสมอทั่วแผ่น ฟักจานเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับแบคทีเรียที่ใช้ แบคทีเรียชนิดต่าง ๆ มีอุณหภูมิการเจริญเติบโตที่แตกต่างกัน หากคุณไม่สามารถหาอุณหภูมิการเจริญเติบโตที่เหมาะสมได้โดยใช้วัสดุอ้างอิงให้ลองทำการใส่แผ่นที่ 25 และ 37 องศา

    ทำซ้ำขั้นตอนที่ 4 แต่ละครั้งที่ถ่ายโอนของเหลวจากหลอดทดลองที่แตกต่างกันไปยังแผ่นที่เกี่ยวข้อง

การคำนวณประชากร

    สังเกตแผ่นเปลือกโลกหกแผ่นและเลือกหนึ่งแผ่นที่มีอาณานิคมแยก 30 ถึง 200

    คูณจำนวนโคโลนีบนจานโดย 10 เพื่อคำนวณจำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตรของการเพาะเลี้ยงจากหลอดเจือจางที่ใช้

    คูณจำนวนจากขั้นตอนที่ 2 ด้วย 10 ^ (หมายเลขแผ่น) เพื่อคำนวณจำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตรของการเพาะเลี้ยงดั้งเดิม ค่า 10 ^ (หมายเลขแผ่น) คือปัจจัยเจือจางของวัฒนธรรมที่ใช้ในการทำให้บริสุทธิ์แผ่นนั้น

    เคล็ดลับ

    คำเตือน