เนื้อหา
Escherichia coli, E. coli เป็นแบคทีเรียที่เติบโตในลำไส้เล็กของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม แบคทีเรียนี้ถูกค้นพบครั้งแรกในปลายปี 1800 ตั้งแต่นั้นมามันมีประวัติยาวนานในการใช้ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ มันเป็นสิ่งมีชีวิตที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในพันธุศาสตร์ระดับโมเลกุล ส่วนหนึ่งของเหตุผลที่มักใช้ E. coli ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์คือมันง่ายที่จะเติบโตในห้องแล็บ ปัจจัยที่ทำให้ E. coli ง่ายต่อการเจริญเติบโตคือความต้องการทางโภชนาการอย่างง่ายอัตราการเติบโตที่รวดเร็วและความต้องการในการบำรุงรักษาในระดับปานกลาง
ฆ่าเชื้อลูปการฉีดวัคซีนโดยวางไว้ในเปลวไฟของเครื่องเผาแผดเผา ผ่านครึ่งล่างของวงผ่านเปลวไฟจนกว่ามันจะเรืองแสงสีแดง
ปล่อยให้วงเย็นลง คุณสามารถสัมผัสกับวุ้นที่ผ่านการฆ่าเชื้อบนจานเพื่อให้แน่ใจว่าเย็นลงแล้ว อย่าวางลูปบนโต๊ะหรือปล่อยให้มันสัมผัสกับสิ่งอื่นใดนอกจากวุ้นที่ผ่านการฆ่าเชื้อหรือวัฒนธรรมที่ต้องการตอนนี้ที่มันผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว
จุ่มห่วงเข้าไปในวัฒนธรรมของ E. coli แล้วเอามันออก
เปิดแผ่นวุ้นและหมุนวนไปมาอย่างนุ่มนวลข้ามพื้นผิวของส่วนหนึ่งของวุ้น ระวังอย่าให้เกาด้วยห่วง วุ้นให้สารอาหารที่จำเป็นต่อการเจริญเติบโตของอีโคไล
วางห่วงในเปลวไฟแผดเผาแผดเผาอีกครั้งเพื่อฆ่าเชื้อ เมื่อแท่งลูปเย็นให้สัมผัสกับส่วนที่ผ่านการฆ่าเชื้อของแผ่นเพื่อให้แน่ใจว่าเย็นแล้วจากนั้นทำการวนลูปผ่านแนวแรกของคุณเพื่อสร้างแนวที่สอง ลายเส้นที่สองนี้เป็นรุ่นที่ปรับลดของลายเส้นแรก ทำซ้ำขั้นตอนการทำหมันและการร่อนจนกว่าแผ่นวุ้นหลายส่วนจะถูกเคลือบ เหตุผลที่คุณทำเช่นนี้คือเพื่อให้คุณสามารถเลือกจากอาณานิคมโคโลนัลเดี่ยว สิ่งนี้จะช่วยให้แน่ใจว่าคุณมีอย่างน้อยหนึ่งส่วนที่มีอาณานิคมส่วนบุคคล - ไม่เข้มข้นเกินไป (ซึ่งจะมีการเติบโตมากเกินไปและไม่อนุญาตให้คุณเลือกจากอาณานิคมเดียว) และไม่เจือจางเกินไป (ซึ่งจะไม่ทำให้อาณานิคม) .
ฆ่าเชื้อห่วงในเปลวไฟเป็นครั้งสุดท้ายก่อนที่จะวางมันไว้ในพื้นที่ทำงาน
ใส่กลับด้านบนลงบนจานวุ้น พลิกแผ่นกลับด้านแล้ววางลงในตู้อบที่ตั้งไว้ที่ 37 องศาเซลเซียส (98.6 องศาฟาเรนไฮต์) อุณหภูมิบ่มเพาะที่เหมาะสมนี้จำลองอุณหภูมิของร่างกายมนุษย์ที่มีเชื้อ E. coli อาศัยอยู่ ภายใน 24 ถึง 48 ชั่วโมงอาณานิคมที่มองเห็นของเชื้อแบคทีเรีย E. coli จะปรากฏในแผ่นวุ้น