ตามที่หน่วยงานคุ้มครองสิ่งแวดล้อมของสหรัฐอเมริการะบุว่า LC50 เป็นสารเคมีในอากาศหรือน้ำซึ่งคาดว่าจะทำให้เกิดการเสียชีวิตใน 50 เปอร์เซ็นต์ของสัตว์ทดลองที่อาศัยอยู่ในอากาศหรือน้ำนั้น ด้วยการทดสอบมักทำกับหนูหรือหนูที่ระดับ LC50 50 เปอร์เซ็นต์ของสัตว์ทดลองจะตายหลังจากสัมผัสเพียงครั้งเดียว การทดสอบเสร็จสิ้นเพื่อกำหนดค่า LC50 ระบุว่าสัตว์ชนิดใดที่ใช้ในการทดสอบ ในขณะที่การทดสอบความเป็นพิษของหนูและหนูไม่ขยายไปถึงผู้คนเสมอไป แต่ค่า LC50 นั้นมีความสำคัญและจะถูกใช้เพื่อความปลอดภัยเมื่อมนุษย์ทำงานรอบวัตถุ
เขียนมาตรฐานการทดสอบของคุณเพื่อรวมสัตว์ที่จะถูกทดสอบจำนวนสัตว์ในแต่ละกลุ่มการทดสอบความเข้มข้นของสารเคมีที่จะทดสอบและความยาวของการเปิดรับ
สัตว์ทดลองกลุ่มหนึ่งทดสอบความเข้มข้นของสารเคมีในสภาพแวดล้อมห้องปฏิบัติการที่ควบคุม ทำต่อไปจนกว่าทุกกลุ่มยกเว้นกลุ่มควบคุมจะได้รับความเข้มข้นของสารเคมีแตกต่างกัน
กำหนดค่า LC50 เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสารเคมีในส่วนต่อล้าน (ppm) ซึ่งอย่างน้อย 50 เปอร์เซ็นต์ของสัตว์ทดลองตาย