เนื้อหา
นักจุลชีววิทยาศึกษาลักษณะของจุลินทรีย์เช่นสาหร่ายโปรโตซัวแบคทีเรียเชื้อราและไวรัสโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ ในขณะที่สิ่งมีชีวิตบางอย่างเช่นโปรโตซัวและเซลล์ยีสต์สามารถสังเกตได้ง่ายโดยใช้ที่เปียกน้ำ แต่เซลล์แบคทีเรียต้องการการย้อมสี นักวิทยาศาสตร์พัฒนาวิธีการหลายอย่างเช่นการย้อมสีแกรมการย้อมด้วยกรดอย่างรวดเร็วและการย้อมสีเรืองแสงเพื่อให้มองเห็นเซลล์แบคทีเรียและโครงสร้างเซลล์ได้ดีขึ้น การใช้วิธีการย้อมสีดังกล่าวเป็นไปได้ที่จะระบุคุณสมบัติเชิงโครงสร้างที่ช่วยจำแนกแบคทีเรีย
การแสดงที่ดีขึ้น
สิ่งมีชีวิตแบคทีเรียมีขนาดเล็กมากซึ่งส่วนใหญ่สามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ที่มีกำลังขยาย 1,000 เท่า อย่างไรก็ตามการขยายขนาดเพียงไม่ได้ให้ระดับความคมชัดที่เพียงพอดังนั้นจึงต้องทำการย้อมสีแบคทีเรียก่อนการสังเกตเพื่อให้ได้ความชัดเจนที่จำเป็นสำหรับการสร้างภาพ
การจำแนกและจำแนกประเภท
การย้อมสีแบคทีเรียเพื่อแยกความแตกต่างระหว่างชนิดของแบคทีเรียเรียกว่าการย้อมสีที่แตกต่างกัน คราบแกรมเป็นหนึ่งในคราบที่แตกต่างดังกล่าวที่แยกความแตกต่างระหว่างแบคทีเรียบนพื้นฐานของเนื้อหาผนังเซลล์ของพวกเขา ในวิธีนี้เซลล์แบคทีเรียทำปฏิกิริยากับคราบคริสตัลไวโอเล็ตเพื่อใช้สีม่วง ในการเพิ่มสารขจัดคราบเซลล์แบคทีเรียบางชนิดจะสูญเสียสีในขณะที่เซลล์อื่นไม่ทำ ในการเพิ่มรอยเปื้อน Safranin เซลล์ที่ถูกปรับสีจะทำให้รอยเปื้อนปรากฏเป็นสีแดงในขณะที่เซลล์แบคทีเรียที่ไม่สูญเสียสีจะยังคงเป็นสีม่วง เซลล์แบคทีเรียที่ใช้สีแดงเรียกว่าสิ่งมีชีวิตที่เป็นลบของแกรมและเซลล์ที่ไม่ใช้สีจะถูกจัดประเภทเป็นสิ่งมีชีวิตที่เป็นบวกแกรม การย้อมสีกรัมเป็นวิธีที่รวดเร็วในการระบุเชื้อแบคทีเรียที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อเบื้องต้น ในทำนองเดียวกันขั้นตอนการย้อมสีด้วยกรดอย่างรวดเร็วช่วยในการระบุสิ่งมีชีวิตที่อยู่ในชั้นเรียนของแบคทีเรียที่เรียกว่า Mycobacteria เช่น Mycobacterium tuberculosis
การตรวจจับความมีชีวิต
ในตัวอย่างวัฒนธรรมแบคทีเรียมักจะมีความสำคัญในการตรวจจับการมีอยู่ของเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิต วิธีการย้อมสีเช่นการย้อมสีเรืองแสงช่วยในการระบุว่าเซลล์เพาะเลี้ยงทำงานได้หรือไม่ แบคทีเรียที่มีชีวิตมีความสามารถในการเปลี่ยน 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) เปื้อนเป็นสีย้อมซึ่งแสดงให้เห็นเรืองแสงสีแดง ดังนั้นเมื่อวัฒนธรรมที่ย้อมด้วย CTC เปล่งแสงดังกล่าวแสดงว่ามีแบคทีเรียที่มีชีวิต Propidium iodide เป็นคราบที่ทำหน้าที่เฉพาะในเซลล์ที่ไม่มีชีวิตซึ่งมีเยื่อหุ้มที่เสียหายดังนั้นจึงมีประโยชน์ในการระบุเซลล์แบคทีเรียที่ตายแล้ว
การระบุโครงสร้างเซลล์
การย้อมสีให้วิธีการแสดงโครงสร้างเซลล์หลายอย่างชัดเจน ตัวอย่างเช่นวิธีการย้อมสี Fuelgen ช่วยให้สามารถระบุนิวเคลียสภายในเซลล์แบคทีเรียในขณะที่รอยเปื้อนของอัลเบิร์ตมีประโยชน์ในการแสดงภาพของเม็ด Metachromatic ในทำนองเดียวกันเทคนิคการทำให้มีสีเงินช่วยให้สามารถระบุสไปโรเชตส์ได้ Flagella นั้นง่ายต่อการสังเกตเมื่อเปื้อนด้วยคราบของ Ryu การย้อมสีมรกตสีเขียวช่วยในการระบุสปอร์ของแบคทีเรีย