ฉันจะแยกแบคทีเรียออกจากดินได้อย่างไร

Posted on
ผู้เขียน: John Stephens
วันที่สร้าง: 22 มกราคม 2021
วันที่อัปเดต: 1 พฤศจิกายน 2024
Anonim
เทคนิคการแยกเชื้อบริสุทธิ์ บทปฏิบัติการที่ 8
วิดีโอ: เทคนิคการแยกเชื้อบริสุทธิ์ บทปฏิบัติการที่ 8

เนื้อหา

การแยกแบคทีเรียออกจากดินเป็นขั้นตอนแรกที่สำคัญในการทดลองทางจุลชีววิทยาจำนวนมาก เมื่อแยกตัวได้แล้วแบคทีเรียจะถูกวิเคราะห์ต่อไปเพื่อกำหนดสิ่งต่าง ๆ เช่นชนิดและหน้าที่ของมันในสภาพดิน แม้แต่ดินเพียงเล็กน้อยก็สามารถมีแบคทีเรียได้นับล้านตัวซึ่งทำให้จำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างดินก่อนที่จะแยกแบคทีเรียออกจากตัวอย่าง

    ขนาด 100 มล. น้ำกลั่นในกระบอกที่สำเร็จการศึกษาและเพิ่มลงในขวดที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

    ชั่งน้ำหนักตัวอย่างดิน 1 กรัมและเพิ่มลงในขวดน้ำกลั่นปิดฝาขวดให้แน่นแล้วเขย่าให้เข้ากัน

    ติดป้ายหลอดทดสอบปลอดเชื้อ "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," และ "10 ^ -6" เติมน้ำกลั่น 9 มิลลิลิตรลงในหลอดแต่ละหลอดโดยใช้ปิเปตอันใดอันหนึ่ง

    โอนสารละลาย 1 มิลลิลิตรในขวดไปยังหลอดที่ระบุว่า "10 ^ -3" โดยใช้ปิเปตใหม่ ปิดฝาหลอดแล้วหมุนเบา ๆ จนกว่าสารละลายจะเข้ากันดี

    โอนสารละลาย 1 มิลลิลิตรในหลอดทดลอง "10 ^ -3" ไปยังหลอด "10 ^ -4" ด้วยปิเปตใหม่ ใส่หลอด "10 ^ -4" แล้วหมุนให้ผสม ทำซ้ำวิธีนี้เพื่อถ่ายโอนสารละลายจากหลอด "10 ^ -4" ไปยังหลอด "10 ^ -5" และจากหลอด "10 ^ -5" ไปยังหลอด "10 ^ -6"

    ใส่ตัวอย่างสามตัวอย่างจากหลอด "10 ^ -4," "10 ^ -5" และ "10 ^ -6" ใช้ปิเปตใหม่เพื่อถ่ายโอนสารละลาย 1 มิลลิลิตรจากหลอดลงในจาน Petri ใส่วุ้นลงในจานประมาณ 15 มล. จากนั้นวางฝาบนจานแล้วหมุนเบา ๆ เพื่อให้วุ้นครอบคลุมด้านล่างของแผ่น

    จัดทำแผ่นควบคุมโดยใส่น้ำกลั่น 1 มล. ลงในจาน Petri โดยใช้ปิเปตใหม่ เพิ่มวุ้น; ใส่ฝาบนและหมุนจาน

    ปล่อยให้แผ่น Petri ตั้งขึ้นจนกระทั่งวุ้นตั้งค่า จากนั้นพลิกแผ่นแล้วฟักไข่ - ทั้งในตู้ฟักไข่หรือที่อุณหภูมิห้อง - เพียง 24 ชั่วโมงถึงห้าวัน

    นำแผ่นออกจากตู้อบหลังจากระยะเวลาการบ่มที่ต้องการ นับจำนวนแบคทีเรียบนจานที่มีอาณานิคมประมาณ 30 ถึง 300 ใช้เครื่องหมายถาวรเพื่อทำเครื่องหมายอาณานิคมที่คุณได้นับไว้แล้วเพื่อหลีกเลี่ยงการนับอาณานิคมเดียวกันสองครั้ง

    แบ่งจำนวนอาณานิคมที่นับด้วยการเจือจาง - "10 ^ -4," "10 ^ -5" หรือ "10 ^ -6" - สำหรับสารละลายดินสำหรับแต่ละแผ่น ค้นหาจำนวนแบคทีเรียที่เพาะปลูกได้ในกรัมดั้งเดิมของดินโดยเฉลี่ยผลลัพธ์จากแต่ละจานที่นับได้

    เคล็ดลับ

    คำเตือน