ห้าขั้นตอนในการเตรียมอาหารวุ้น

Posted on
ผู้เขียน: Louise Ward
วันที่สร้าง: 8 กุมภาพันธ์ 2021
วันที่อัปเดต: 18 พฤษภาคม 2024
Anonim
ขั้นตอนที่ 1-1 การเตรียมอาหารเชื้อวุ้น PDA
วิดีโอ: ขั้นตอนที่ 1-1 การเตรียมอาหารเชื้อวุ้น PDA

วุ้นเป็นสารที่มีลักษณะคล้ายวุ้นที่ได้มาจากผนังเซลล์บริสุทธิ์ของสาหร่ายสีแดงมันถูกเพิ่มเข้าไปในสื่อทางจุลชีววิทยาซึ่งเป็นวัสดุที่มีการปลูกเชื้อจุลินทรีย์ในห้องปฏิบัติการเพื่อให้โครงสร้างที่เป็นของแข็งกับสารมากขึ้น Agar ไม่มีคุณค่าทางโภชนาการดังนั้นเมื่อนักวิทยาศาสตร์ใช้เพื่อเพาะเลี้ยงเชื้อจุลินทรีย์พวกเขาจะเพิ่มสารอาหารต่าง ๆ เพื่อเพิ่มการเจริญเติบโตของแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อหรือหลอดทดลอง เมื่อนักวิจัยเก็บแบคทีเรียในหลอดทดลองมันถูกเรียกว่าเป็นวุ้นเอียงเนื่องจากสื่อการเจริญเติบโตของของเหลวแข็งตัวในขณะที่หลอดอยู่ในตำแหน่งเอียง ฝาเกลียวบนแกนเอียงป้องกันไม่ให้วุ้นแห้ง

    สื่อเตรียมแตกต่างกันไปสำหรับเอียงกว่าจานเลี้ยงเชื้อ การทำหมันทำได้โดยใช้วุ้นในหลอด จาน Petri จะผ่านการฆ่าเชื้อก่อนที่จะผ่านการฆ่าเชื้อด้วยวุ้น วัดปริมาณน้ำที่ต้องการและใส่ลงในขวดแก้ว Erlenmeyer ตั้งไฟบนเตาจนเกือบเดือด เพิ่มส่วนผสมอื่น ๆ หากจำเป็นและกวนส่วนผสมอย่างช้าๆและต่อเนื่องจนกว่าจะละลาย ส่วนผสมเหล่านี้อาจรวมถึงสารสกัดจากเนื้อวัว, เปปโตนและบัฟเฟอร์ pH ขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ที่เพาะเลี้ยง

    ก่อนที่จะเติมผงวุ้นแห้งให้ผสมกับน้ำกลั่นเย็นจำนวนเล็กน้อยเพื่อป้องกันการจับเป็นก้อน ใช้ความระมัดระวังเมื่อเพิ่มวุ้นลงในของเหลวร้อนเพราะสามารถเกิดฟองและล้นหม้อได้ เพิ่ม agar จำนวนเล็กน้อยในแต่ละครั้งและคนเพื่อกระจาย agar อย่างสม่ำเสมอ ปิดความร้อนเมื่อส่วนผสมเริ่มเป็นไอก่อนที่จะเดือด

    วางหลอดทดลองที่ยังไม่ได้เปิดบนชั้นวางหลอดทดลอง เติมหลอดทดลองโดยการถ่ายโอนประมาณ 5 มิลลิลิตร - ประมาณ 0.17 ออนซ์หรือ 1 ช้อนชา - ของวุ้นหลอมเหลวจากหม้อโดยใช้ปิเปตที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ปิดฝาหลอดทดสอบแต่ละอันให้หลวมเพราะวุ้นจะไม่ผ่านการฆ่าเชื้อหากปิดผนึกแน่น ฆ่าเชื้อหลอดทั้งหมดในหม้อนึ่งความดันประมาณ 25 นาทีที่ 121 องศาเซลเซียสหรือ 250 องศาฟาเรนไฮต์

    เมื่อวุ้นยังร้อนอยู่ให้เอียงชั้นวางหลอดทดสอบอย่างระมัดระวังบนพื้นผิวที่แข็งหรือหนังสือหนาตรวจสอบให้แน่ใจว่าสื่อที่อยู่ภายในหลอดนั้นอยู่ในตำแหน่งที่เอียงเมื่อเทียบกับหลอดทดลอง ปล่อยให้สื่อเย็นและแข็งที่มุมนี้ซึ่งจะเป็นการเพิ่มพื้นที่ผิวของวุ้น ขันแคปของหลอดทดสอบให้แน่นหลังจากที่วุ้นเย็นลงแล้ว Slants พร้อมใช้งานทันทีที่วุ้นแข็งตัวแล้ว สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องหรือในตู้เย็นเพื่อใช้ในอนาคต

    ฉีดวัคซีนให้เอียงโดยการถ่ายโอนเซลล์ที่มีการฉีดวัคซีนจากเชื้อจุลินทรีย์กลุ่มเดียวบนจานไปยังพื้นผิวเอียง ย้ายห่วงข้ามพื้นผิวของตัวเอียงและปะยางกลับคืน ฟักตัวเอียงจนกว่าจะมีหลักฐานการเจริญเติบโตจากนั้นใส่ท่อในตู้เย็น